本发明公开了炭黑曲霉转化黄芪甲苷制备6-0-葡萄糖-环黄芪醇的方法,具体涉及一种利用炭黑曲霉(Aspergillus carbonarius.CICC 41254)在适量黄芪粉为诱导物的前提下,以黄芪甲苷为底物发酵转化制得6-0-葡萄糖-环黄芪醇,并将发酵所得发酵液经水饱和正丁醇萃取、硅胶柱层析以及乙醇重结晶,最终得到纯度达到95%以上的6-0-葡萄糖-环黄芪醇产品。本发明是利用微生物转化法制备6-0-葡萄糖-环黄芪醇,其特点在于底物黄芪甲苷几乎全部转化,转化率高,方法简单易行,成本低,且对环境无污染,适合工业化生产。